1929年，外交事務(wù)再次影響繪畫館。圣座與意大利王國(guó)簽訂了《拉特蘭條約》，該條約確定了梵蒂岡國(guó)的政治和領(lǐng)土主權(quán)，其中的第18條，確認(rèn)了圣座對(duì)其收藏的所有權(quán)。只有一個(gè)附加條件：這些藝術(shù)瑰寶要永久對(duì)公眾開放。藏品當(dāng)時(shí)都放在圖書館一翼，無法滿足上述要求，所以又開始準(zhǔn)備新一輪遷移，同時(shí)伴隨著龐大的建筑工程。

1932年10月27日，庇護(hù)十一世指定由建筑師盧卡·貝爾特拉米設(shè)計(jì)一座新文藝復(fù)興主義風(fēng)格的建筑，該建筑就是今天的梵蒂岡繪畫陳列館。史上第一次，這些收藏終于有了一個(gè)專屬的展示空間，空間充足，光線適當(dāng)。除了繪畫館的建筑之外，還修建了一條直接通向梵蒂岡博物館的通道，訪客可以直接從梵蒂岡大道前來，不再需要穿越梵蒂岡宮。直到2000年，這塊新的入口區(qū)域一直是梵蒂岡博物館的主要游覽入口，建筑師朱塞佩·莫莫和雕塑家安東尼奧·馬拉伊尼為其設(shè)計(jì)了著名的雙螺旋樓梯，現(xiàn)在作為出口使用，也是羅馬最知名的建筑藝術(shù)作品之一。

1932年的作品整理過程，有一個(gè)很重要的步驟：重新懸掛繪畫，它們首次按照時(shí)間順序和流派陳列。經(jīng)過一些調(diào)整之后，這次重新懸掛的結(jié)果一直持續(xù)到今天。前兩個(gè)房間從中世紀(jì)“原初”時(shí)期作品延續(xù)到早期文藝復(fù)興大師的作品，特別是喬托、西莫內(nèi)·馬丁尼、貝爾納多·達(dá)迪、安東尼奧·韋內(nèi)齊亞諾。隨后的五個(gè)房間中，是15世紀(jì)意大利大師們的作品，包括弗拉·安杰利科、菲利波·利比、貝諾佐·戈佐利、卡羅·克里韋利、安東尼奧·維瓦里尼、平圖里基奧和佩魯吉諾的作品。第八號(hào)房間專門獻(xiàn)給拉斐爾，是藏品中特別的亮點(diǎn)。其中不僅有其主要的祭壇畫和祭壇座畫，還包括一系列按照拉斐爾的設(shè)計(jì)完成的織毯。接下來的三個(gè)房間中是16世紀(jì)意大利藝術(shù)的精品，包括達(dá)·芬奇、拉斐爾畫派其他畫家、提香和委羅內(nèi)塞等威尼斯畫派大師的作品。有三個(gè)房間獻(xiàn)給17世紀(jì)大師，也值得重點(diǎn)關(guān)注，包括：卡拉瓦喬、普桑、薩索菲拉托和卡羅·馬拉塔。接下來的兩個(gè)房間包含18、19世紀(jì)的作品。倒數(shù)第二個(gè)房間中，放置著貝爾尼尼設(shè)計(jì)圣彼得大教堂中的“教宗座椅”時(shí)使用的模型。全部的展品，以最后一個(gè)房間中15世紀(jì)到16世紀(jì)的圣像作為壓軸。

梵蒂岡繪畫陳列館的收藏使觀者體驗(yàn)了一次歐洲藝術(shù)史之旅，特別是意大利藝術(shù)。梵蒂岡的繪畫收藏現(xiàn)在超過450件，作品種類繁多，質(zhì)量極高，包括各個(gè)時(shí)期的代表作，這令其聲名遠(yuǎn)揚(yáng)。由于這是教廷的收藏，所以重點(diǎn)放在宗教相關(guān)的藝術(shù)上，其中涵蓋了過去幾個(gè)世紀(jì)最重要的藝術(shù)作品。在這一背景下，主題極為廣泛：圣母的畫像旁邊，就是各種圣人的故事，還有基督生涯的各個(gè)階段。正是由于這種類似主題的延續(xù)不斷，在梵蒂岡繪畫陳列館中，從中世紀(jì)到現(xiàn)代主義伊始，各個(gè)時(shí)期重要畫家的特點(diǎn)和奇異之處逐一在觀者面前展開，觀者得以進(jìn)一步了解、比較這些作品，這一點(diǎn)，恐怕沒有哪里的收藏能與之相提并論。