123,123,123

內(nèi)容簡(jiǎn)介

　　《不同能量狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)肌源性IL-6表達(dá)的機(jī)制研究》目的：IL-6是一種多效的細(xì)胞因子，運(yùn)動(dòng)時(shí)IL-6主要來(lái)源于骨骼肌。本研究以體外培養(yǎng)的C2C12小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞為模型，觀察糖剝奪（Glucosedeprivation，GD）對(duì)肌源性IL-6基因表達(dá)和蛋白水平的影響，探討糖剝奪狀態(tài)下誘導(dǎo)肌源性IL-6表達(dá)的信號(hào)調(diào)控機(jī)制。方法：（1）培養(yǎng)C2C12細(xì)胞，誘導(dǎo)分化為成熟的肌管細(xì)胞。（2）以含葡萄糖4．5g／L（對(duì)照GC組）和不含葡萄糖（糖剝奪GD組）培養(yǎng)基處理細(xì)胞0、6、12、18、24小時(shí)，分別采用Real-Time PCR和雙抗夾心ELISA方法測(cè)定細(xì)胞IL-6mRNA和培養(yǎng)基中IL-6蛋白水平。（3）GD狀態(tài)下，分別加入ROS清除劑（NAC）、p38MAPK抑帶劑（SB203580）和NF-KB抑制劑（NF-KB Activation Inhibitor）阻斷與IL-6表達(dá)有關(guān)的信號(hào)通路，ELISA檢測(cè)24小時(shí)后IL-6蛋白水平。結(jié)果：（1）GD組所有時(shí)間點(diǎn)IL-6mRNA表達(dá)均高于GC組，其中在18和24小時(shí)差異具有顯著性（p<><><><><>0．05）。結(jié)論：（1）體外培養(yǎng)C2C12小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化模型成功建立，可用于糖剝奪對(duì)IL-6表達(dá)影響及其調(diào)控機(jī)制研究。（2）正常培養(yǎng)的C2C12細(xì)胞存在IL-6基因表達(dá)和蛋白釋放現(xiàn)象，糖剝奪可增強(qiáng)IL-6基因表達(dá)和蛋白釋放。（3）糖剝奪誘導(dǎo)的肌源性IL-6表達(dá)是多條信號(hào)通路共同作用的結(jié)果，ROS和p38MAPK信號(hào)通路在糖剝奪誘導(dǎo)肌源性IL-6表達(dá)的信號(hào)調(diào)控過程中起到主要作用。（4）NF-KB信號(hào)通路在糖剝奪誘導(dǎo)的肌源性IL-6表達(dá)的信號(hào)調(diào)控過程中不起主要作用。

作者簡(jiǎn)介

　　張雪琳，女，現(xiàn)任首都體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)科學(xué)與健康學(xué)院生理生化教研室教師，碩士研究生導(dǎo)師，主要研究方向?yàn)椤斑\(yùn)動(dòng)能量代謝與健康”。1999年畢業(yè)于河北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物教育專業(yè)，理學(xué)學(xué)士；2002年畢業(yè)于河北師范大學(xué)體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)人體科學(xué)專業(yè)，運(yùn)動(dòng)生理學(xué)方向，教育學(xué)碩士，導(dǎo)師何玉秀教授；2009年畢業(yè)于北京體育大學(xué)運(yùn)動(dòng)人體科學(xué)專業(yè)，運(yùn)動(dòng)生物化學(xué)方向，教育學(xué)博士，導(dǎo)師謝敏豪教授。20l1年，入選北京市屬高等學(xué)校人才強(qiáng)教深化計(jì)劃“中青年骨干人才培養(yǎng)計(jì)劃”項(xiàng)目；2015年入選北京市屬高等學(xué)校高層次人才引進(jìn)與培養(yǎng)計(jì)劃“青年拔尖人才培育計(jì)劃”項(xiàng)目。作為負(fù)責(zé)人主持的主要項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目：“17β-HSD11在有氧運(yùn)動(dòng)調(diào)控骨骼肌脂滴動(dòng)態(tài)變化及改善胰島素抵抗中的作用”；國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目“脂滴與線粒體相互作用在運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)骨骼肌脂代謝中的作用機(jī)制”；北京市教育委員會(huì)科技計(jì)劃面上項(xiàng)目“PLIN3在運(yùn)動(dòng)調(diào)控骨骼肌脂代謝及改善胰島素抵抗中的作用”等6項(xiàng)。在北京體育大學(xué)攻讀博士學(xué)位期間參與導(dǎo)師謝敏豪教授主持的國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目“運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)肌源性白介素-6分泌及其調(diào)控能量代謝的機(jī)制與應(yīng)用”和國(guó)家科技攻關(guān)計(jì)劃“提高運(yùn)動(dòng)員體能的關(guān)鍵技術(shù)研究”。在同外SCI期刊上發(fā)表論文6篇；在同內(nèi)核心期刊發(fā)表論文10余篇；20余篇論文摘要分別人選國(guó)際和國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)會(huì)議；參與編寫《運(yùn)動(dòng)內(nèi)分泌學(xué)》教材等。

圖書目錄

摘要
1 前言
2 文獻(xiàn)綜述
2．1 IL-6的生物學(xué)特性
2．1．1 IL-6的分子特征
2．1．2 IL-6受體系統(tǒng)與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
2．1．3 IL-6的主要生物學(xué)功能
2．2 運(yùn)動(dòng)與肌源性IL-6
2．2．1 運(yùn)動(dòng)對(duì)機(jī)體IL-6水平的影響
2．2．2 運(yùn)動(dòng)時(shí)IL-6的主要來(lái)源——骨骼肌
2．3 肌源性IL-6在能量代謝調(diào)控中的生物學(xué)作用
2．3．1 肌源性IL-6促進(jìn)脂代謝
2．3．2 肌源性IL-6促進(jìn)肝臟葡萄糖輸出
2．3．3 肌源性IL-6調(diào)節(jié)骨骼肌糖代謝
2．4 不同能量狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)肌源性IL-6表達(dá)的信號(hào)調(diào)控機(jī)制
2．4．1 不同能量狀態(tài)對(duì)運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)肌源性IL-6表達(dá)的影響
2．4．2 與不同能量狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)肌源性IL-6表達(dá)有關(guān)的信號(hào)通路
2．5 成肌細(xì)胞在運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
2．5．1 成肌細(xì)胞的生物學(xué)特性
2．5．2 成肌細(xì)胞在肌肉骨骼系統(tǒng)疾病基因治療中的應(yīng)用
2．5．3 成肌細(xì)胞在骨骼肌基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用
2．6 選題依據(jù)及實(shí)驗(yàn)總體設(shè)計(jì)
2．6．1 選題依據(jù)
2．6．2 實(shí)驗(yàn)總體設(shè)計(jì)
3 研究方法
3．1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
3．1．1 實(shí)驗(yàn)材料
3．1．2 主要試劑與耗材
3．1．3 主要儀器
3．2 實(shí)驗(yàn)方法
3．2．1 C2C12小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)分化培養(yǎng)
3．2．2 糖剝奪對(duì)c2c12細(xì)胞IL-6表達(dá)水平影響的實(shí)驗(yàn)方案
3．2．3 糖剝奪狀態(tài)下抑制相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)IL-6表達(dá)水平影響的實(shí)驗(yàn)方案
3．2．4 Real-Time PCR測(cè)定C2C12細(xì)胞IL-6mRNA表達(dá)水平
3．2．5 雙抗夾心ELISA法測(cè)定C2C12細(xì)胞培養(yǎng)基IL-6蛋白濃度
3．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4．1 C2C12小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)分化培養(yǎng)
4．2 糖剝奪對(duì)C2C12細(xì)胞IL-6表達(dá)水平的影響
4．2．1 糖剝奪對(duì)C2C12細(xì)胞IL-6mRNA表達(dá)水平的影響
4．2．2 糖剝奪對(duì)C2C12細(xì)胞IL-6蛋白水平的影響
4．3 糖剝奪狀態(tài)下抑制相關(guān)信號(hào)通路對(duì)C2c12細(xì)胞IL-6表達(dá)水平的影響
4．3．1 糖剝奪狀態(tài)下抑制R0S信號(hào)通路對(duì)C2C12細(xì)胞IL-6表達(dá)水平的影響
4．3．2 糖剝奪狀態(tài)下抑制p38MAPK信號(hào)通路對(duì)C2c12細(xì)胞IL-6表達(dá)水平的影響
4．3．3 糖剝奪狀態(tài)下抑制NF-KB信號(hào)通路對(duì)C2C12細(xì)胞IL-6表達(dá)水平的影響
4．3．4 糖剝奪狀態(tài)下抑制不同信號(hào)通路對(duì)C2C12細(xì)胞IL-6表達(dá)水平影響的比較
5 討論
5．1 C2C12小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化模型的建立
5．2 糖剝奪狀態(tài)下肌源性IL-6表達(dá)及釋放的規(guī)律
5．3 糖剝奪狀態(tài)下調(diào)控肌源性IL-6表達(dá)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
5．3．1 糖剝奪狀態(tài)下ROS信號(hào)通路對(duì)肌源性IL-6表達(dá)的影響
5．3．2 糖剝奪狀態(tài)下p38MAPK信號(hào)通路對(duì)肌源性IL-6表達(dá)的影響
5．3．3 糖剝奪狀態(tài)下NF-KB信號(hào)通路對(duì)肌源性IL-6表達(dá)的影響
5．3．4 糖剝奪狀態(tài)下調(diào)控肌源性IL-6表達(dá)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
5．4 小結(jié)
6 結(jié)論與展望
6．1 結(jié)論
6．2 展望
7 參考文獻(xiàn)
8 主要縮略詞表
9 附錄
致謝