酶工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

第一部分 酶學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)1
實(shí)驗(yàn)一 酶促反應(yīng)中初速度時(shí)間范圍測(cè)定 1
實(shí)驗(yàn)二 pH對(duì)酶活力的影響——最適pH的測(cè)定 5
實(shí)驗(yàn)三 溫度對(duì)酶活力的影響——最適溫度的測(cè)定 8
實(shí)驗(yàn)四 米氏常數(shù)和最大反應(yīng)速率的測(cè)定 11
實(shí)驗(yàn)五 抑制條件下Km和vmax的測(cè)定及抑制類型的判定 15

第二部分 微生物發(fā)酵產(chǎn)酶實(shí)驗(yàn) 20
實(shí)驗(yàn)六 產(chǎn)淀粉酶菌株的快速篩選 20
實(shí)驗(yàn)七 堿性蛋白酶高產(chǎn)菌株的選育 24

第三部分 酶的提取與分離純化實(shí)驗(yàn) 28
實(shí)驗(yàn)八 酵母中蔗糖酶的提取及酶活測(cè)定 28
實(shí)驗(yàn)九 α-淀粉酶的提取及活力測(cè)定 32
實(shí)驗(yàn)十 酸性磷酸酯酶的提取和酶活力測(cè)定 36
實(shí)驗(yàn)十一 溶菌酶的制備及活力測(cè)定 40
實(shí)驗(yàn)十二 大蒜細(xì)胞SOD的提取和分離 43
實(shí)驗(yàn)十三 離子交換色譜法分離蛋白 46
實(shí)驗(yàn)十四 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白 50

第四部分 酶的固定化及分子修飾實(shí)驗(yàn) 57
實(shí)驗(yàn)十五 蔗糖酶包埋及固定化酶活測(cè)定 57
實(shí)驗(yàn)十六 尼龍固定化木瓜蛋白酶 60
實(shí)驗(yàn)十七 酵母細(xì)胞固定化 63
實(shí)驗(yàn)十八 膽綠素還原酶的修飾與活性基團(tuán)的鑒定 66

第五部分 酶的應(yīng)用實(shí)驗(yàn) 69
實(shí)驗(yàn)十九 淀粉的糖化及DE值的測(cè)定 69
實(shí)驗(yàn)二十 酶法澄清蘋(píng)果汁加工工藝優(yōu)化 74
實(shí)驗(yàn)二十一 酶反應(yīng)器設(shè)計(jì)及酪蛋白水解物的制備 76
實(shí)驗(yàn)二十二 酶試紙法檢測(cè)樣品中H2O2的濃度 79
實(shí)驗(yàn)二十三 鄰苯二酚雙加氧酶基因在大腸桿菌中的表達(dá) 82

參考文獻(xiàn) 86

附錄 88