酶工程（第3版）

第一篇 基礎(chǔ)酶學(xué)
第一章　酶學(xué)與酶工程 2
第一節(jié) 酶工程概述 2
一、酶與酶工程 2
二、酶工程簡(jiǎn)介 3
第二節(jié) 酶的分類、組成、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和作用機(jī)制 4
一、酶的分類 4
二、酶的組成和結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 5
三、酶的作用機(jī)制 6
第三節(jié) 酶催化劑的特點(diǎn) 11
一、高效性 11
二、專一性 11
三、可調(diào)節(jié)性 13
第四節(jié) 影響酶活性的因素 14
一、酶活測(cè)定方式 14
二、酶聯(lián)測(cè)定法 15
三、酶反應(yīng)速率 15
四、底物濃度 16
五、酶濃度 16
六、溫度 16
七、pH 16
第五節(jié) 酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和抑制作用 17
一、米-曼氏模式 17
二、Lineweaver-Burk作圖 18
三、酶的抑制作用 18
第六節(jié) 酶的制備 20
一、酶的來(lái)源 20
二、蛋白質(zhì)表達(dá)常見問題及解決方式 21
第七節(jié) 蛋白質(zhì)、酶和重組蛋白的分離純化 26
一、蛋白質(zhì)純化的一般考慮 26
二、蛋白質(zhì)的粗分離 28
三、蛋白質(zhì)的大規(guī)模分離純化 32
總結(jié)與展望 36
參考文獻(xiàn) 36
第二篇 實(shí)踐酶學(xué)
第二章　非水酶學(xué) 40
第一節(jié) 概述 40
第二節(jié) 傳統(tǒng)非水酶學(xué)中的反應(yīng)介質(zhì) 40
一、水-有機(jī)溶劑單相系統(tǒng) 40
二、水-有機(jī)溶劑兩相系統(tǒng) 41
三、含有表面活性劑的乳液或微乳液系統(tǒng) 41
四、微水有機(jī)溶劑單相系統(tǒng) 42
五、無(wú)溶劑或微溶劑反應(yīng)系統(tǒng) 42
六、氣相反應(yīng)介質(zhì) 43
第三節(jié) 非水介質(zhì)中酶的結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 43
一、非水介質(zhì)中酶的結(jié)構(gòu) 43
二、非水介質(zhì)中的酶學(xué)性質(zhì) 46
第四節(jié) 影響非水介質(zhì)中酶催化的因素以及調(diào)控策略 49
一、有機(jī)溶劑 49
二、水 51
三、添加劑 55
四、生物印跡 55
五、化學(xué)修飾 55
六、固定化酶 56
七、反應(yīng)溫度 57
八、pH 和離子強(qiáng)度 57
第五節(jié) 非水介質(zhì)中酶催化的應(yīng)用 57
一、酯的合成 57
二、肽的合成 59
三、高分子的合成與改性 60
四、光學(xué)活性化合物的制備 63
第六節(jié) 非水酶學(xué)的最新研究技術(shù) 64
一、非水酶學(xué)中的新型反應(yīng)介質(zhì) 64
二、非水酶學(xué)中的新技術(shù) 76
三、尋找和改造耐有機(jī)溶劑的酶 83
總結(jié)與展望 85
參考文獻(xiàn) 85
第三章　酶的化學(xué)修飾 91
第一節(jié) 化學(xué)修飾的方法學(xué) 91
一、修飾反應(yīng)專一性的控制 91
二、修飾程度和修飾部位的測(cè)定 93
三、化學(xué)修飾結(jié)果 94