中國(guó)大麥a-淀粉酶活性分析

第一章 α-淀粉酶酶活性的研究 第一節(jié) α-淀粉酶家族蛋白結(jié)構(gòu)、酶切及底物的特異性結(jié)合特性綜述 1．1 淀粉酶的研究進(jìn)展 1．2 α-淀粉酶反應(yīng)機(jī)理 1．3 淀粉識(shí)別和淀粉結(jié)合結(jié)構(gòu)域(sBD) 1．4 大麥α-淀粉酶同工酶特性的研究 第二節(jié) Amy32b基因的遺傳多樣性及其對(duì)α-淀粉酶活性的影響 1 材料與方法 1．1 植物材料 1．2 LB液體培養(yǎng)基 1．3 方法 1．4 引物設(shè)計(jì)及基因擴(kuò)增 1．5 重組蛋白表達(dá)的誘導(dǎo) 2 結(jié)果 2．1 Amy32b的遺傳多樣性 2．2 Amy32b的等位基因分布 3 討論 3．1 Amy32b的遺傳多樣與α-淀粉酶基因活性 3．2 Amy32b的遺傳多樣性分布與進(jìn)化 4結(jié)論 第二章 關(guān)聯(lián)分析在植物中的應(yīng)用 第一節(jié) 關(guān)聯(lián)分析概述 1．1 配子相的不平衡 1．2 標(biāo)記與性狀問(wèn)的關(guān)聯(lián)方法 1．3 關(guān)聯(lián)分析基因型的確定與研究進(jìn)展 1．4 關(guān)聯(lián)分析在人類疾病研究的現(xiàn)狀及展望 1．5 關(guān)聯(lián)作圖在植物中的應(yīng)用 第二節(jié) 中國(guó)大麥地方品種的遺傳多樣性及α-淀粉酶活性的全基因組關(guān)聯(lián) 分析 導(dǎo)言 1 材料與方法 1．1 作圖群體與表型性狀 1．2 SSR分子標(biāo)記分析 1．3 基因型分析 1．4 群體結(jié)構(gòu)分析 1．5 關(guān)聯(lián)分析及等位效應(yīng)分析 2 結(jié)果 2．1 SSR標(biāo)記位點(diǎn)的遺傳多樣性 2．2 中國(guó)大麥地方品種的聚類分析 2．3 群體結(jié)構(gòu)分析 2．4 連鎖不平衡分析 2．5 與α-淀粉酶活性關(guān)聯(lián)的SSR位點(diǎn) 2．6 SSR關(guān)聯(lián)位點(diǎn)等位變異的表型效應(yīng)值及等位變異平均效應(yīng) 3 討論 3．1 中國(guó)大麥地方品種遺傳多樣性及其分布 3．2 α-淀粉酶活性的關(guān)聯(lián)分析定位 4 結(jié)論 第三章 植物赤霉素與α-淀粉酶基因的表達(dá) 第一節(jié) 植物中赤霉素(GA)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子機(jī)理 1 通過(guò)對(duì)赤霉素響應(yīng)突變體的突變鑒定赤霉素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的組件 1．1 赤霉素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)圖途徑中的正向調(diào)節(jié)因子 1．2 赤霉素信號(hào)中轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的抑制調(diào)節(jié)因子 1．3 擬南芥中赤霉素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的模式 1．4 水解酶的順式作用元件 第二節(jié) 大麥α-淀粉酶基因Amy6-4表達(dá)模式的半定量RT-PcR分析 1 材料與方法 1．1 RNA提取和cDNA第一鏈合成 1．2 cDNA第一鏈合成 l 3 引物設(shè)計(jì) 1．4 PCR循環(huán)數(shù)的確定 2 結(jié)果與分析 2．1 RNA提取 2．2 半定量RT-PcR循環(huán)數(shù)的確定 2．3 不同發(fā)芽時(shí)間Amy6-4基因表達(dá) 3 結(jié)論與討論 第四章 淀粉的生物降解與∞淀粉酶活性的研究 第一節(jié) 植物中淀粉的生物降解 1 α-淀粉酶的酶學(xué)特性 2 功能性α-淀粉酶基因的表達(dá) 3 脫支酶(DEB)、β-淀粉酶和α-葡聚糖酶 3．1 脫支酶 3．2 β-淀粉酶 3．3 α-葡萄糖苷酶 4 馬鈴薯貯藏淀粉的降解 5 擬南芥葉片中同化淀粉的降解 6 谷物細(xì)胞中的淀粉降解 7 質(zhì)體蛋白作用新靶向途徑 第二節(jié) 中國(guó)大麥地方品種的α-淀粉酶酶活性研究 1 材料與方法 1．1 試驗(yàn)材料和田間試驗(yàn) 1．2 α-淀粉酶活性測(cè)定 1．3 統(tǒng)計(jì)分析 2 結(jié)果與分析 2．1 發(fā)芽種子的α-淀粉酶活性 2．2 α-淀粉酶活性的品種間分布與品種比較 2．3 大麥干種子的α-淀粉酶活性 2．4 測(cè)定年份和方法對(duì)α-淀粉酶活性的影響 3 討論 3．1 中國(guó)大麥的α-淀粉酶活性 3．2 影響α-淀粉酶活性鑒定的因素 3．3 α-淀粉酶活性鑒定的適宜方法 3．4 α-淀粉酶活性鑒定的最佳時(shí)間 4 結(jié)論 附錄