神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)

序
前言
1  神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)
  1.1  科學(xué)思維方法學(xué)
    1.1.1  科學(xué)技術(shù)的歷史動(dòng)力
    1.1.2  辯證地去求索
    1.1.3  辯證地去思考
    1.1.4  辯證地去驗(yàn)證
    1.1.5  辯證地去訓(xùn)練
  1.2  實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法學(xué)
    1.2.1  選題
    1.2.2  專業(yè)設(shè)計(jì)
    1.2.3  對(duì)照設(shè)計(jì)
    1.2.4  統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)
  1.3  實(shí)驗(yàn)分析方法學(xué)
    1.3.1  數(shù)據(jù)整理
    1.3.2  統(tǒng)計(jì)分析
    1.3.3  專業(yè)分析
    1.3.4  論文書寫
  1.4  電刺激方法學(xué)
    1.4.1  電刺激的基本原理
    1.4.2  電刺激的物理特性
    1.4.3  神經(jīng)制備的生物特性
    1.4.4  選擇性刺激
    1.4.5  刺激電流擴(kuò)散
  1.5  電記錄方法學(xué)
    1.5.1  容積導(dǎo)體內(nèi)記錄
    1.5.2  誘發(fā)電位記錄
    1.5.3  單單位記錄
    1.5.4  計(jì)算機(jī)輔助的記錄
    1.5.5  細(xì)胞內(nèi)記錄
    1.5.6  膜片鉗記錄
    1.5.7  神經(jīng)纖維速度譜測(cè)定
    1.5.8  軸突分叉點(diǎn)位置測(cè)定
    1.5.9  壓腳痛閾測(cè)定法
  1.6  神經(jīng)化學(xué)方法學(xué)
    1.6.1  組織細(xì)胞破碎法
    1.6.2  突觸體制備
    1.6.3  電泳法
    1.6.4  色譜法
    1.6.5  高效液相色譜法
    1.6.6  微透析技術(shù)
  1.7  化學(xué)神經(jīng)解剖學(xué)方法學(xué)
    1.7.1  免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
    1.7.2  原位雜交組織化學(xué)技術(shù)
    1.7.3  受體定位技術(shù)
    1.7.4  免疫電子顯微鏡技術(shù)
  1.8  神經(jīng)形態(tài)學(xué)方法學(xué)
    1.8.1  辣根過氧化物酶示蹤技術(shù)
    1.8.2  熒光素示蹤技術(shù)
    1.8.3  放射性核素示蹤技術(shù)
    1.8.4  順行示蹤技術(shù)
    1.8.5  激光掃描共焦顯微鏡技術(shù)
    1.8.6  定量及分析細(xì)胞學(xué)技術(shù)
  1.9  分子神經(jīng)生物學(xué)方法學(xué)
    1.9.1  核酸分子雜交技術(shù)
    1.9.2  蛋白質(zhì)印跡法
    1.9.3  DNA重組技術(shù)
    1.9.4  聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)
    1.9.5  DNA序列測(cè)定技術(shù) 
    1.9.6  mRNA差異顯示技術(shù)
    1.9.7  基因芯片技術(shù)
    1.9.8  轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)
  1.10  神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)
    1.10.1  行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的神經(jīng)基礎(chǔ)及常用動(dòng)物
    1.10.2  常用的高級(jí)腦功能研究方法
    1.10.3  常用痛行為研?方法
  1.11  腦成像
    1.11.1  計(jì)算機(jī)輔助體層攝影
    1.11.2  磁共振成像
    1.11.3  放射性核素?cái)鄬映上?br />    1.11.4  超聲成像
2  神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)與示教
  2.1  神經(jīng)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)
    2.1.1  家兔外周神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位記錄
    2.1.2  家兔后肢傳人神經(jīng)纖維速度譜
    2.1.3  擴(kuò)張肛門對(duì)貓骶?經(jīng)后根放電的影響
    2.1.4  大鼠脊髓節(jié)段性及下行性誘發(fā)電位記錄
    2.1.5  脊髓節(jié)段性缺血時(shí)脊髓誘發(fā)電位的變化
    2.1.6  家兔大腦皮質(zhì)體感誘發(fā)電位記錄
    2.1.7  腦缺血對(duì)家兔大腦皮質(zhì)誘發(fā)電位的變化
    2.1.8  蟾蜍離體脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元靜息膜電位與動(dòng)作電位記錄
    2.1.9  大鼠培養(yǎng)腦細(xì)胞膜的電學(xué)特性
    2.1.10  大鼠在體脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢坏募?xì)胞內(nèi)記錄
    2.1.11  貓脊髓背索突觸后神經(jīng)元的細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞外記錄
    2.1.12  貓脊頸束一背索突觸后神經(jīng)元的順、逆向反應(yīng)
    2.1.13  大鼠脊髓背角神經(jīng)元電活動(dòng)的細(xì)胞內(nèi)記錄：
    2.1.14  大鼠脊孤束一背索突觸后神經(jīng)元對(duì)軀體與內(nèi)臟傳人的反應(yīng)
    2.1.15  家兔中縫大核對(duì)外周傳入刺激的反應(yīng)
    2.1.16  家兔丘腦腹后外側(cè)核電活動(dòng)的細(xì)胞外記錄
    2.1.17  軀體內(nèi)臟傳入在脊髓背角的相互作用
    2.1.18  缺氧預(yù)適應(yīng)鼠腦提取液對(duì)ATP敏感性鉀電流的作用
  2.2  神經(jīng)化學(xué)實(shí)驗(yàn)
    2.2.1  缺氧耐受小鼠腦勻漿提取液的抗缺氧作用
    2.2.2  急性重復(fù)缺氧小鼠腦單胺類含量的變化。
    2：2.3  不同強(qiáng)度軀體刺激對(duì)家兔腦脊液中□、M□含量的影響
    2.2.4  不同強(qiáng)度軀體刺激對(duì)家兔腦脊液中單胺類含量的影響
    2.2.5  兔腦內(nèi)腺苷的微透析法測(cè)定
    2.2.6  缺氧對(duì)小鼠大腦皮質(zhì)突觸體LDH透出率的影響
    2.2.7  低氧預(yù)適應(yīng)小鼠腦勻漿提取液對(duì)PCI2細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng)
  2.3  神經(jīng)組織免疫細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)
    2.3.1 延髓背角和中縫大核內(nèi)的P物質(zhì)樣陽(yáng)性結(jié)構(gòu)——免疫細(xì)胞化學(xué)或免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色法
    2.3.2 大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)阿片弘受體與降鈣素基因相關(guān)肽共存的陽(yáng)性神經(jīng)元——免疫熒光細(xì)胞化學(xué)雙重?記染色法
    2.3.3 大鼠延髓背角淺層內(nèi)P物質(zhì)樣陽(yáng)性終末與含鈣結(jié)合蛋白神經(jīng)元的聯(lián)系——免疫熒光細(xì)胞化學(xué)雙標(biāo)染色及激光掃描共焦顯微鏡觀察
    2.3.4 面口部注射甲醛溶液后大鼠延髓背角內(nèi)的FOS樣陽(yáng)性神經(jīng)元觀察——免疫細(xì)胞化學(xué)染色法
    2.3.5 大鼠中縫核簇內(nèi)5-羥色胺樣陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)FOS蛋白——免疫細(xì)胞化學(xué)雙標(biāo)染色法
    2.3.6 大鼠延髓背角內(nèi)向丘腦投射的FOS樣陽(yáng)性神經(jīng)元——逆行標(biāo)記與免疫細(xì)胞化學(xué)雙標(biāo)染色法
    2.3.7 大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)鈣結(jié)合索mRNA陽(yáng)性神經(jīng)元的分布——放射性核素標(biāo)記的原位雜交組織化學(xué)法
    2.3.8 大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)內(nèi)的5-羥色胺樣陽(yáng)性亞微結(jié)構(gòu)——免疫電鏡法
    2.3.9 大鼠孤束核內(nèi)CABA能纖維終末與P物質(zhì)受體樣陽(yáng)性神經(jīng)元的突觸聯(lián)系——包埋前與包埋后免疫電鏡雙標(biāo)記法
    2.3.10 大鼠延髓背角內(nèi)GABA能神經(jīng)元與P物質(zhì)能纖維終末的突觸聯(lián)系——包埋前免疫電鏡雙標(biāo)記法
  2.4  神經(jīng)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)
    2.4.1  大鼠脊髓灰質(zhì)向孤束核的投射
    2.4.2  貓脊髓背角神經(jīng)元向外側(cè)頸核和背索核的分支投射
    2.4.3  大鼠脊孤束-背索突觸后神經(jīng)元的超(亞)微結(jié)構(gòu)
    2.4.4 大鼠脊孤束-背索突觸后神經(jīng)元對(duì)軀體感覺核與內(nèi)臟感覺核的分支投射
    2.4.5  大鼠脊髓立體定位磁控過半夾斷模型
    2.4.6  大鼠臂旁核向杏仁中央核的投射——HRP逆行追蹤方法‘
    2.4.7 大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)向伏核的5-羥色胺能投射——HRP逆行追蹤與免疫細(xì)胞化學(xué)染色相結(jié)合的雙標(biāo)記法
    2.4.8 大鼠延髓背角內(nèi)P物質(zhì)受體樣陽(yáng)性神經(jīng)元向丘腦膠狀質(zhì)核投射——熒光素逆行追蹤與免疫熒光染色相結(jié)合的雙標(biāo)記方法
    2.4.9  大鼠中縫大核向脊髓背角和延髓背角的分支投射——熒光素雙標(biāo)記法
    2.4.10 中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)和中縫背核內(nèi)5-羥色胺能神經(jīng)元的下行分支投射——熒光素雙標(biāo)記與免疫熒光染色相結(jié)合的三標(biāo)記法
    2.4.11 大鼠三叉神經(jīng)脊束核吻側(cè)亞核向三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核的投射一植物凝集素(PHA-L)順行示蹤法.-‘
    2.4.12 大鼠延髓背角淺層向臂旁外側(cè)核及丘腦腹后內(nèi)側(cè)核的投射——BDA順行示蹤法 
    2.4.13 大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)-中縫大核-三叉神經(jīng)感覺核簇的間接投射——PHA-L順行示蹤與HRP逆行追蹤相結(jié)合的雙標(biāo)記法的光鏡觀察
    2.4.14 大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)-中縫大核-三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)亞核的間接投射——PHA-L順行示蹤與ItRP逆行追蹤相結(jié)合的雙標(biāo)記法的電鏡觀察
    2.4.15 大鼠延髓背角向丘腦投射神經(jīng)元與5-羥色胺陽(yáng)性終末的突觸聯(lián)系——HRP逆行追蹤與免疫細(xì)胞化學(xué)染色雙標(biāo)記法
    2.4.16 大鼠孤束核-臂旁核-中央杏仁核的間接投射通路——潰變與}tRP逆行追蹤相結(jié)合的雙標(biāo)記法“
  2.5  分子神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
    2.5.1  用差異顯示法分離特異表達(dá)的基因片段
    2.5.2  慢性缺氧培養(yǎng)細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子-1的提取與檢測(cè)
    2.5.3  大鼠三叉神經(jīng)節(jié)總RNA的提取及cDNA的制備
    2：5.4  5-HT3受體亞型mRNA在大鼠三叉神經(jīng)節(jié)的表達(dá)
    2.5.5  乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶在大鼠紋狀體的表達(dá)及其DNA片段的回收
    2.5.6  乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶DNA片段的亞克隆
    2.5.7  ChAT-pGEM重組質(zhì)粒DNA的制備及限制性酶酶切分析
    2.5.8  ChAT-pGEM重組質(zhì)粒DNA序列的測(cè)定
    2.5.9  乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶表達(dá)蛋白的SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析
    2.5.10  乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶在大鼠紋狀體分布的Western印跡檢測(cè)
    2.5.11 性激素對(duì)周圍傷害性刺激誘導(dǎo)脊髓PPDmRNA表達(dá)上調(diào)的影響 
    2.5.12 坐骨神經(jīng)部分切斷后初級(jí)感覺神經(jīng)元(背根節(jié))的差異表達(dá)基因克隆
  2.6  神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)
    2.6.1  一足致炎大鼠雙足痛感受性的變化
    2.6.2  甲醛溶液致炎大鼠疼痛行為的觀察
    2.6.3  神經(jīng)反射在一足致炎大鼠非致炎足痛閾變化中的作用
    2.6.4  體液因素在一足致炎大鼠非致炎足痛閾變化中的作用
    2.6.5  急性缺氧預(yù)適應(yīng)對(duì)小鼠缺氧耐受性的影響
    2.6.6  麻醉與興奮小鼠缺氧耐受性的變化
    2.6.7  大鼠脊髓橫斷及半橫斷模型的復(fù)制
    2.6.8  慢性束縛應(yīng)激對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響^
    2.6.9  創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型大鼠的自發(fā)活動(dòng)和焦慮水平檢測(cè)
3  神經(jīng)生物學(xué)資料
  3.1  神經(jīng)生物學(xué)常見概念
    3.1.1  生物電學(xué)常見概念
    3.1.2  生物化學(xué)常見詞匯
    3.1.3  細(xì)胞培養(yǎng)常見詞匯
    3.1.4  分子生物學(xué)常見詞匯
  3.2  常用的實(shí)驗(yàn)方法
    3.2.1  電生理學(xué)儀器方法
    3.2.2  動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施
  3.3  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用數(shù)據(jù)
    3.3.1  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用生理數(shù)據(jù)
    3.3.2  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用麻醉劑與肌肉松弛劑
  3.4  常用試劑、緩沖液、貯存液與酶的配制
    3.4.1  組織培養(yǎng)常用試劑
    3.4.2  電泳緩沖劑
    3.4.3  常用貯存液
    3.4.4  常用酶的配制
  3.5  常用限制性酶識(shí)別序列
  3.6  常用細(xì)胞系、細(xì)胞培養(yǎng)基、抗生素
    3.6.1  細(xì)胞系
    3.6.2  常用培養(yǎng)液成分及配方
    3.6.3  抗生素
  3.7  核酸、蛋白質(zhì)常用數(shù)據(jù)及相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照物
    3.7.1  常用核酸的長(zhǎng)度與相對(duì)分子質(zhì)量
    3.7.2  常用蛋白質(zhì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照物
  3.8  赫爾辛基宣言Ⅱ