分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

第1章 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)概述
第2章 染色體DNA和RNA的制備
實(shí)驗(yàn)2.1 細(xì)菌染色體DNA的提取
實(shí)驗(yàn)2.2 酵母染色體DNA的提取
實(shí)驗(yàn)2.3 SDS裂解法提取絲狀真菌染色體DNA
實(shí)驗(yàn)2.4 RNA的提取
實(shí)驗(yàn)2、5 凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化
實(shí)驗(yàn)2.6 核酸純度、濃度與相對(duì)分子質(zhì)量的測定
第3章 載體的制備
實(shí)驗(yàn)3.1 質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
實(shí)驗(yàn)3.2 λ噬菌體DNA的提取
實(shí)驗(yàn)3.3 λDNA去磷酸化臂的制備
第4章 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)4.1 限制性核酸內(nèi)切酶的酶切反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)4.2 酶切DNA片段的CIP處理
實(shí)驗(yàn)4.3 酶切DNA片段的分離與回收
實(shí)驗(yàn)4.4 載體與外源DNA的連接反應(yīng)
第5章 重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)5.1 感受態(tài)細(xì)胞的制備及質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)5.2 λ噬菌體載體與外源DNA片段的連接、體外包裝與擴(kuò)增（基因組文庫的構(gòu)建）
第6章 重組子的鑒定和外源基因的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)6.1 E.coli轉(zhuǎn)化子的篩選與驗(yàn)證
實(shí)驗(yàn)6.2 Southern印跡雜交
實(shí)驗(yàn)6.3 Northern印跡雜交
實(shí)驗(yàn)6.4 斑點(diǎn)印跡雜交
實(shí)驗(yàn)6.5 外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)
實(shí)驗(yàn)6.6 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測重組蛋白的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)6.7 Western印跡技術(shù)檢測重組蛋白的表達(dá)
第7章 在釀酒酵母中克隆表達(dá)外源基因
實(shí)驗(yàn)7.1 酵母染色體DNA的提取
實(shí)驗(yàn)7.2 木糖還原酶基因的獲得
實(shí)驗(yàn)7.3 重組質(zhì)粒的構(gòu)建（酶切連接）
實(shí)驗(yàn)7.4 酵母質(zhì)粒的小量提取與插人方向驗(yàn)證
實(shí)驗(yàn)7.5酵母菌LiAc完整轉(zhuǎn)化酵母細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)7.6釀酒酵母轉(zhuǎn)化子的驗(yàn)證
實(shí)驗(yàn)7.7重組酵母木糖還原酶活性的測定
實(shí)驗(yàn)7.8重組酵母菌株發(fā)酵實(shí)驗(yàn)及發(fā)酵產(chǎn)物分析
第8章 絲狀真菌的轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)化子的篩選
實(shí)驗(yàn)8.1 瑞氏木霉原生質(zhì)體的制備與轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)8.2 瑞氏木霉原生質(zhì)體電轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)8.3 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瑞氏木霉轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)8.4 振蕩破壁法快速小量提取瑞氏木霉染色體DNA
實(shí)驗(yàn)8.5 瑞氏木霉潮霉素抗性轉(zhuǎn)化子的PCR鑒定
第9章 PCR技術(shù)原理與應(yīng)用
實(shí)驗(yàn)9.1 PCR擴(kuò)增目的片段
實(shí)驗(yàn)9.2 一步法RT—PCR
實(shí)驗(yàn)9.3 兩步法RT—PCR
第10章 工程菌的培養(yǎng)與目標(biāo)產(chǎn)物的分離
實(shí)驗(yàn)10.1 重組E.coli誘導(dǎo)表達(dá)外源內(nèi)切B-1，4-葡聚糖酶
實(shí)驗(yàn)10.2 從E.coli中提取純化目的重組蛋白
附錄